New Dianthus 高通量親和力篩選平臺

—— 突破性的光譜位移技術(shù)，助您解決親和力篩選的挑戰(zhàn)

重要靶點和候選藥物的親和力篩選非常具有挑戰(zhàn)性。當您的親和力篩選項目涉及到PROTAC二元和三元復合物，片段化合物庫及固有無序蛋白時，需要進行樣品固定的SPR技術(shù)和樣品消耗量大的ITC技術(shù)的檢測 難度會大大增加。 而這些恰好是Dianthus擅長的應用領(lǐng)域。

1. 在高難度親和力篩選項目中獲得成功

（1）以值得信賴的結(jié)果推動篩選項目進展

在面對高難度篩選時，大多數(shù)生物物理方法僅能提供低質(zhì)量數(shù)據(jù)，有些甚至不能使用。Dianthus產(chǎn)出的高信噪比數(shù)據(jù)可以消除 hits 篩選 (尤其是親和力檢測) 中的—切不確定性。讓您對數(shù)據(jù)與決策都充滿信心。

（2）從真實樣本中獲得有效的數(shù)據(jù)結(jié)果，無需在方法開發(fā)中耗費過多時間

許多生物物理方法需要高純度樣品才能產(chǎn)生好的數(shù)據(jù)，從而導致項目延誤，給篩選團隊帶來很大壓力。Dianthus 可以從真實樣本中獲得高質(zhì)量數(shù)據(jù)，讓您免受聚集體、雜質(zhì)或沉淀等問題的困擾。

（3）依靠高靈敏度的生物物理方法發(fā)現(xiàn)更 多有價值的 Hits

為了避免錯失有價值的 hits，研究人員需 要同時使用多種方法進行正交驗證，但這也使整個流程變得耗時費力。Dianthus 可以檢測非常細檄的光譜位移，可檢測到更多的結(jié)合分子并降低假陰性率。

2. 解決 SPR 和 IT 等技術(shù)遇到的常見問題

同其他科學家一樣，您在攻關(guān)篩選項目的過程中一定也會被相同的問題所困擾。Dianthus讓您輕松專注于自己的研究項目，無需再擔心這些問題。

（1）親和力檢測范圍廣：Dianthus可以檢測極寬范圍的親和力 — 從皮摩爾級 (pM) 到毫摩爾級 (mM) — 因此您可以研究非常強和非常弱的結(jié)合反應。

（2）溶液中檢測,無需固定：在面對高難度靶點時，Dianthus為您提供理想的分析環(huán)境，可在自然條件的溶液中進行檢測。您不必擔心靶點分子的結(jié)合位點受到干擾，或無法控制平衡體系。

（3）樣品消耗量很低：相比其他方法，Dianthus的樣品量極少，可為您節(jié)省寶貴的蛋白樣品及化合物。

（4）自動化運行親和力篩選項目：通過微孔板形式與多種自動化解決方案相兼容。即使無人值守，您的篩選實驗也可以不間斷運轉(zhuǎn)。

3. Dianthus是您自始至終值得信賴的篩選平臺

（1）Hits發(fā)現(xiàn)：更快地發(fā)現(xiàn) hits，是提高藥物研發(fā)效率的最關(guān)鍵步驟。無論是基于片段篩選或是小分子單點篩選，Dianthus 都能幫助您快速發(fā)現(xiàn) hits，并進行確認。

（2）先導化合物 (Leads) 確認：Dianthus 可以生成簡單、易于解釋的親和力排序表和注釋，幫助您決速確定合適的候選分子，并馬上開始先導化合物 (leads) 的優(yōu)化，您無需在強、弱活性分子的排序上花費過多時間。

（3）Leads優(yōu)化：—旦確認完成，下—步就需要提高化合物的特異性、選擇性以及效價。使用 Dianthus 可以確認那些化合物的親和力有無變化。這—數(shù)據(jù)與您的 ADME, 毒理以及 PK/PD結(jié)果—起，可以幫助您開發(fā)潛力的候選藥物分子。

4. 當藥物研發(fā)過程涉及到這些具有挑戰(zhàn)性的分子時，請別過早放棄

在涉及到以下幾類分子時，Dianthus 可以助您消除 hits 發(fā)現(xiàn)和 leads 優(yōu)化中的障礙。

（1）PROTACs 等小分子蛋白降解劑：如果采用基于分子量變化的結(jié)合檢測方法，您在檢測像 warheads 這樣的小分子時會在方法開發(fā)上耗費大量精力。同時，由于需要對二元復合物進行固定，三元復合物的研究在基于芯片固定的檢測方法中會變得非常雜。Dianthus 在溶液中檢測且不依賴于分子量變化 —— 這正是您在篩選PROTAC篩選所需要的。

（2）片段化合物庫：由于化合物片段分子量極低，基于分子量變化的篩選方法很難從小分子片段庫中發(fā)現(xiàn) hits。此外，您還面臨著兼顧弱親和力 (hits發(fā)現(xiàn)階段) 和強親和力 (leads優(yōu)化階段) 檢測的挑戰(zhàn)。Dianthus不依賴于分子量變化且寬范圍的檢測可以解決這兩大問題。

（3）固有無序蛋白 IDPs：Dianthus 在溶液中檢測，因此沒有破壞 IDPs 構(gòu)象平衡的風險--而這恰恰是需要固定的檢測方法的通病。而且由于 Dianthus 僅需低濃度的靶標分子，IDPs的聚集不會干擾結(jié)合分子的篩選。

5. 兩種生物物理檢測方法確保您成功完成篩選

面對不同類型分子間的高難度相互作用，您往往需要采用不同的方式進行檢測。因此，一臺具備兩種不同檢測模式的儀器能夠幫助您檢測所有類型的分子互作。

（1）Dianthus是采用光譜位移技術(shù)進行親和力篩選的平臺

盡管光譜位移的概念并不新奇，但 Dianthus 是將這項技術(shù)應用于親和力定量檢測的儀器平臺。實驗流程非常簡單：我們對靶標分子進行熒光標記，然后將其與一系列梯度稀釋的配體分子等量混合。以 590nm 激發(fā)光對混合物進行熒光激發(fā)后，配體與靶標分子的結(jié)合可通過發(fā)射光譜的藍移或紅移得到檢測。Dianthus在等溫條件下精確檢測 650 nm 和 670 nm 雙波長的發(fā)射光，因而能夠準確測到極細微的光譜位移。

接下來，以配體濃度為橫坐標，雙波長熒光強度的比值為縱坐標作圖,擬合得到平衡解離常數(shù)K_d值。

（2）使用TRIC這項歷時10年驗證的成熟技術(shù)對光譜位移進行補充

TRIC 技術(shù)是通過對靶標分子進行熒光標記，并使其與配體分子混合來定量檢測分子間相互作用。隨后，通過激光，在溶液中制造一個精確而短暫的溫度變化，可放大由配體與靶標分子結(jié)合引起的熒光強度變化。以配體濃度為橫坐標，熒光值為縱坐標作圖，從而獲得平衡解離常數(shù)K_d值。